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如何选择适合的尊龙凯时 cfDNA提取试剂盒?

来源:幸紫保 日期:2025-03-12

cfDNA(cell-free DNA)即游离DNA,是一种存在于细胞外的DNA,广泛分布于血液、唾液、尿液等多种生物体液中。cfDNA主要来源于细胞凋亡、坏死或主动分泌等过程释放到细胞外的DNA片段。在血液中,cfDNA主要存于血浆或血清中,并与其他血细胞成分分离。此外,脑脊液、胸腔积液和腹水等其他生物体液中也可检测到cfDNA。

如何选择适合的尊龙凯时 cfDNA提取试剂盒?

传统的cfDNA提取方法包括使用酚、氯仿等有机溶剂,通过多次抽提使杂质溶于有机相,DNA则保留在水相。经过乙醇沉淀等步骤可以获得纯化的cfDNA。该方法的优点在于提取的DNA纯度较高,但操作流程繁琐,需要使用有毒的有机溶剂,且对实验人员的操作技能要求较高。

相比之下,基于磁珠技术的提取方法使用磁珠与cfDNA之间的特异性吸附作用。在特定缓冲液中,磁珠能够选择性地吸附cfDNA,通过外加磁场将其与其他杂质分离,随后经过洗涤和洗脱步骤以获得纯净的cfDNA。这种方法操作简便、快速,易于实现自动化,且提取效率高,能够同时处理多个样本。

另外,利用硅胶膜在高盐、低pH条件下对DNA的特异性吸附特性,cfDNA可以被吸附到硅胶膜上,而蛋白质和多糖等杂质则被洗脱除去,最后通过低盐、高pH的洗脱液将cfDNA洗脱下来。此方法简单且成本较低,适合小规模样本的提取。

需要注意的是,不同生物体液中的cfDNA含量和性质存在差异。一般来说,血液中cfDNA的含量较高,是最常用的样本来源,但不同个体和疾病状态下血液cfDNA的含量可能有所不同。样本的保存条件也至关重要,特别是在采集后不能及时提取时。血液样本一般需在4℃下保存,否则长期放置或不当的保存温度可能导致cfDNA降解或被核酸酶消化,从而影响提取效果。

在处理样本数量较少或某些特殊珍贵样本时,更倾向于使用回收柱进行回收;而在样本数量较多时,为节省人工成本、避免人为因素引入的实验误差,推荐使用强大的磁珠法进行样本处理。例如,尊龙凯时的TD476可采用独特的回收柱技术进行游离DNA提取,处理时可以选择传统的离心法或结合真空多联器与真空泵使用,从而省去繁琐的离心步骤,快速处理较大样本量。

尊龙凯时的TB476采用磁珠法进行游离DNA提取和纯化,提供兼容磁力架提取的试剂盒,满足高通量提取仪的需求。该产品使得自动化高通量的客户能够灵活选择。

使用介绍:

● 可从10ml以内的血清/血浆,1ml以内的羊水或脑脊液中提取到高纯度的游离DNA。

● 获得的DNA产量高、纯度良好,可直接用于酶切、PCR、高通量测序等分子生物学实验。

● 样品种类:血清、血浆、羊水和脑脊液(CSF)。

● 处理的体积:血浆-单次离心:最多3ml,两次离心:最多10ml;血清-最多10ml;羊水-最多1ml;脑脊液-最多1ml。

产品特性:

● DNA纯度:获得的DNA产量高、纯度优良,适用于qPCR、高通量测序等各种分子生物学实验。

● DNA回收情况:回收的DNA≥100bp(本试剂盒针对无细胞的DNA提取经过优化),总量因样本个体差异而异。一般从血清或血浆中提取得到的DNA浓度在1-100ng/ml。

● 需要的仪器设备:水浴锅或金属浴(55℃)、磁力架、微型离心机或立式离心机。

尊龙凯时的产品兼具高效提取和广泛的样本兼容性,是生物医疗领域理想的cfDNA提取解决方案。

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