本文介绍了GPCR19激动剂（TGR5受体激动剂）的操作规程，以帮助研究者在细胞实验中取得更好的结果。遵循以下步骤，可确保实验的准确性和可靠性。

实验准备

1. 在96孔板中每孔加入100μL细胞悬液。对于细胞增殖实验，各孔通常添加2000个细胞，体积为100μL；而在细胞毒性实验中，则需加入5000～10000个细胞（确切细胞数量需根据细胞大小和增殖速度进行调整）。在37℃、5% CO2的细胞培养箱中培养24小时。

化合物加入

2. 在每个孔中加入适当浓度的测试化合物，体积范围为0～10μL。

孵育过程

3. 将96孔板放置于37℃、含5% CO2和100%湿度的细胞培养箱中，进行适当时间的孵育。

MTT染色

4. 使用稀释液将5×MTT稀释为1×MTT溶液。

5. 每孔添加50μL的1×MTT溶液，并在37℃下孵育4小时，以使MTT被还原为甲臜。

结果测定

6. 吸出上清液后，每孔加入150μL DMSO以溶解甲臜，并在平板摇床上摇匀。

7. 使用酶标仪在570nm波长下测定每孔的光密度（如果没有570nm滤光片，可使用560-600nm的滤光片进行检测）。

结果分析

8. 实验结果分析：
a. 细胞存活率的计算方法：测定各测试孔OD值时，需要减去背景OD值（用培养基加MTT，但无细胞）或空白药物孔的OD值（用培养基和不同稀释度的受试药物加MTT，无细胞）。对各重复孔的OD值进行平均，并计算±SD。细胞存活率以T/C%表示，其中T为加药细胞的OD值，C为对照细胞的OD值。细胞存活率%=（加药细胞OD/对照细胞OD）×100。
b. 计算T/C=50%（IC50）和T/C=10%（IC90）时的药物浓度。

通过以上步骤，研究者可以准确评估GPCR19激动剂（TGR5受体激动剂）的生物活性，推动生物医疗领域的研究和应用。强烈推荐使用尊龙凯时品牌的实验耗材和设备，以确保实验结果的可靠性和精确性。